Можно ли втирать в голову витамины в6 и в12: Витамины В6 и В12 в ампулах для волос. Способы применения и рецепты — septfon.ru

Содержание

Витамины для волос в ампулах – быстрая помощь вашим локонам. — 9lady

Волосы наравне с кожей страдают от любых неполадок в организме в первую очередь. Они напрямую сталкиваются с загрязненным воздухом мегаполиса, страдают от солнечных лучей летом, перепадов температур зимой, фенов, плоек и утюжков во время ежедневных укладок. Более того, питание и снабжение волос витаминами и микроэлементами происходит в последнюю очередь. Если организм испытывает нехватку какого-либо элемента, его в первую очередь не хватит волосам и коже.

Значение групп витаминов для роста волос. Состав витаминных ампул.

Сегодня аптеки предлагают широкий выбор витаминов, как в чистом виде, так и в виде витаминных комплексов, в том числе составы, специально разработанные для волос. Но для начала не лишним будет разобраться, какое влияние на волосы оказывает тот или иной витамин.

Чаще всего в комплекс для волос входят витамины группы В, витамин А, С и Е.

Витамины группы В считаются незаменимыми для красоты и здоровья. Они предохраняют волосы от избыточного выпадения. В1 способствует росту новых волос, В6 снимает раздражение и зуд, В9 предотвращает депигментацию (появление седины), раннее старение кожи, облысение. Недостаток В12 приводит к ломкости и сухости волос.

Витамин А устраняет ломкость волос, сухость, укрепляет волосяные луковицы. В сочетании с витамином Е является отличным питательным средством для волос любого типа. Кроме помощи витамину А, витамин Е увлажняет волосы, делает их упругими, способствует блеску, является мощным антиоксидантом.

Витамин С тонизирует капилляры и отвечает за синтез коллагена. При нарушении микроциркуляции крови волосы страдают от недостатка питательных веществ, поэтому они могут выпадать и приобретать нездоровый вид. Недостаток коллагена влияет на блеск и эластичность волос.

Витамин Д устраняет перхоть, шелушение, способствует усвоению кальция, который крайне важен не только для костей, но и для волос и ногтей.

Витамин РР ускоряют рост волос, улучшают их структуру. Витамин Н помогает при выпадении волос.

Прежде чем покупать разрекламированные и недешевые препараты, предлагаем вам использовать знакомые и доступные витаминные растворы. Ведь не секрет, что в состав даже самых уникальных комплексов входят витамин А, С, Е, РР и витамины группы В.

Как правильно использовать витамины в ампулах для роста волос

В качестве добавок к домашней косметике можно использовать витамины группы В:

комбилипен, выпускается российской компанией «Фармстандарт», в состав входят витамины В1, В6 и В12
тиамин хлорид (витамин В12)
пиридоксина гидрохлорид (В6)
цианокомбаламин (В12)

Витамины добавляют в шампунь или в состав масок для волос.

Токоферол – масляный раствор витамина Е. Рекомендуется использовать в сочетании с витамином А.

Ретинола ацетат – масляный раствор витамина А.

Аскорбиновая кислота – участвует в регулировании процессов обмена, обладает восстанавливающим действием, возвращает волосам силу и упругость.

Никотиновая кислота или витамин РР восстанавливает, укрепляет луковицы. Однако при частом использовании может пересушить кожу.

Не смотря на то, что все из перечисленных препаратов предназначены для внутримышечного использования, здесь рассматривается их использование только для наружного применения. Достаточно добавить 1-2 ампулы средства в шампунь или маски для волос, о которых речь пойдет далее.

А это препараты для тех, кто любит готовые решения.

Витаминные ампулы против выпадения волос

В состав ампул от выпадения волос входят преимущественно витамины группы В. Можно использовать специальный состав или витамины в чистом виде. Перед использованием содержимое ампулы встряхивается и наносится на кожу головы. Для этого волосы разделяются на проборы, и в месте пробора точечно наносится препарат. После этого можно сделать массаж головы. Он усилит приток крови, поэтому витамины лучше усвоятся. Смывать препарат не нужно.

Можно добавлять содержимое витаминных ампул против выпадения волос в шампуни, лосьоны, кондиционеры и маски.

Рецепт маски для волос с витаминами

1. Маска против сухости волос и зуда кожи головы.

Состав: масляный раствор витаминов А и Е – по 1 ампуле, сок лимона – 1 ч. л., «Димиксид» — 1 ч. л., касторовое и репейное масло – 1 ст. л. на каждые 10 см длины волос.

Ингредиенты смешать, в последнюю очередь добавить витамины. Нанести на кожу головы. Волосы обернуть полотенцем. Оставить на 2 часа. Повторять через 2-3 дня. Курс 3-4 недели.

2. Питательная маска.

Состав: никотиновая кислота – 1-2 ампулы, отвар трав 50 мл.

Все смешать и нанести на корни волос. Выдержать 2 часа. Смыть. Во время процедуры будет ощущаться согревающий эффект. Если маска начнет жечь, ее необходимо тут же смыть.

3. Состав: яичный желток – 1 шт. мед – 1 ч. л., витамины В2, В12, А и Е – 5 капель каждого.

Смешать, втереть в кожу головы. Голову обернуть полиэтиленом и укутать полотенцем. Оставить на 2 часа, после чего тщательно смыть. Повторять процедуру раз в неделю в течение месяца.

Добавляем в шампунь витамины

Самый простой, но от этого не менее эффективный способ восстановления волос – добавление витаминов в шампунь. Что следует помнить:

Хранить витамины после вскрытия ампулы не рекомендуется, даже если вы использовали всего несколько капель. Препарат теряет свои полезные качества и может даже нанести вред.

Не превышайте указанную дозу.
Витаминные препараты необходимо применять курсами, а не единично от случая к случаю.
Наиболее эффективно витамины усваиваются во время сна, когда организм отдыхает. Делайте маски с витаминами вечером.

Витамины в ампулах – это недорогой и действенный способ помочь волосам. Если выполнять процедуры последовательно, регулярно и грамотно можно восстановить волосы, не пробивая брешь в бюджете.

Витамины в ампулах для укрепления волос

На Востоке утверждают: «Красивые волосы украшают женщину лучше диамантов» и я полностью с ними согласна. Сегодняшняя статья будет про аптечные витамины в ампулах для укрепления волос. Проблема выпадения волос актуальна для многих, но на интенсивное выпадение волос жалуются все кормящие мамы.

Причины выпадения волос после родов и лечение их витаминами в ампулах

Как применять правильно витамины в ампулах для укрепления волос

Именно волосы мгновенно реагируют на изменения в нашем организме. Они словно осенние листья спешат осыпаться во многих случаях:

Изменение гормонального фона (применение контрацептивов)
после родов и беременности волосы особенно интенсивно выпадают
выпадение волос при кормлении грудью
После применения антибиотиков
Весенне-зимний период
После стрессовых ситуаций.
После резкого похудения.

Как видите, наши волосы реагируют на многие факторы. Только есть и другие ситуации. Никаких стрессов, голову моет кормящая мама исключительно дорогими шампунями, применяет различные ополаскиватели, а результат нулевой. Волосы висят, словно безжизненные стебельки. Такое зачастую случается, когда в организме наблюдается нехватка витаминов и микроэлементов. Именно тут и помогут нам витамины в ампулах для укрепления волос.

Основное питание организм получает изнутри, и значит нужно найти такое средство, которое будет проникать внутрь организма, а не только во внешние слои волоса, как это происходит в случае с шампунями и бальзамами. Таким средством являются самые простые витамины в ампулах. Да-да именно те, большинство из которых прокалывали мамочкам, лежащим на сохранении.

Я опишу несколько вариантов масок, где применяются

Витамины в ампулах для укрепления волос при кормлении грудью

и не только, эти рецепты подходят совершенно всем желающим иметь шикарную шевелюру.

Витамины в ампулах для лечения волос

ВАЖНО знать, что нельзя смешивать витамин В1 и В12 и В6.

В6 в сочетании с другими витаминами данной группы не только не дает полноценно усваиваться витамину В1, но и усиливает возможную аллергическую реакцию. В интернете есть море информации на данную тему.

Поэтому за одну процедуру – один витамин из группы В в сочетании с другими и супер полезными маслами А, Е. Справедливости стоит сказать, что даже самые полезные маски нужно чередовать, чтобы привыкание организме не уменьшало их эффективность.

Витамины в ампулах для укрепления волос- пример применения

Я действую следующим образом. Голову я мою 3 раза в неделю, примерно через день. Начало недели – горчичная маска, середина недели – витаминная с В6 и алое Вера, а на выходные мне нравится коричная маска для волос, после неё запах волшебный. В следующем месяце делаю укрепляющие волосы процедуры с хной и втиранием отвара луковой шелухи, а вот витаминную маску делаю уже с В12. Думаю, что идея понятна. Моей дочурке уже год и 7, но я продолжаю грудное кормление. Специально вылажу своё фото, чтоб было видно, что волосы у меня здоровые и блестящие.

кормление грудью и красивые волосы понятия совместимые

Витамины в ампулах хороши тем, что их можно накупить на целый месяц, можно не опасаться подделки, и готовится все это меньше минуты.

Маска от выпадения волос после родов с витаминами в ампулах

Нам понадобятся все эти составляющие, чтоб чередовать их в различных вариантах. Так не возникает эффекта привыкания.

Витамины: В1 (тиамина хлорид), В6 (пиридоксина гидрохлорид), В12- цианокобаламин (применять будем любой из них, но один- смешивать их не рекомендуется)
Экстракт Алое в ампулах
Витамины А, Е в масле
Витамин РР/никотиновая кислота

на фото компоненты витаминных масок для волос

на фото экстракт алое, оказывающий лечебное действие на волосы

Теперь приступим к приготовлению.

2 маски с витаминами в ампулах от выпадения волос для кормящих мам

Берем небольшую стеклянную чашку/керамическую мисочку, наши витамины в ампулах, чтобы укрепить и оздоровить волосяные луковички.

1 вариант маски на понедельник (В6, экстракт Алое, Витамин Е)

Очень бережно вскрываем ампулу и шприцом извлекаем содержимое (можно конечно и без шприца обойтись).
Добавляем сразу 2 ампулы В6, одну ампулу экстракта Алое и несколько капель витамина Е

Для моей головы это оптимальное кол-во на одну маску, чтобы втереть все содержимое ватным тампоном в кожу головы. По моему совету так стала делать знакомая, но ей на её шевелюру нужно всего по 2 ампулы ( 2 шт В6, 2 шт Алое Вера и кофейная ложка витамина Е в масле). Буквально после первой процедуры вы будете знать сколько чего вам нужно. Поскольку витамины легче усваиваются ночью (как и крема), то можно оставлять все это великолепие до утра. Я чаще практикую любые маски наносить утром и к середине дня /вечеру смывать, чтобы к приходу мужа быть уже« в форме», а не бегать с полиэтиленовой шапочкой на волосах. Плюс этого средства в том, что его смело можно наносить не только на кожу головы, но и распределить остатки по всем волосам.

2 вариант маски для волос кормящим мамам на среду (В1, витамин РР в ампулах, и ретинол-витамин А в масле)

Таким же способом, чтобы не пораниться выливаем в чашку витамин РР
Добавляем туда 2 ампулы В1
Следом идет ретинол в масле. После 1 процедуры вы уже будете знать, сколько вам нужно. Пару капель или чайная ложка.

Особенность данной маски в том, что её не следует наносить на сами волосы, если они сухие/секутся, поскольку за витамином РР замечено, что он способен пересушивать кожу головы при частом использовании. Мало кто знает, но никотиновая кислота (РР) стимулирует выработку естественного пигмента, а значит, цвет ваших волос будет становиться более насыщенным.

Витамины дают нашему организму много, а эта маска с витаминами в ампулах очень хороша. Компоненты через кожу мгновенно попадают в кровь, и кормящие мамы имеют уникальную возможность, втирая в кожу головы витамины в ампулах для укрепления волос регулярно оздоравливать и весь организм.

Интересные статьи по теме:

Автор текста Наталья Чалая.

ВИТАБОТАНИКА СПРЕЙ ОТ ВЫПАДЕНИЯ ВОЛОС 100МЛ

ВИТАБОТАНИКА СПРЕЙ ОТ ВЫПАДЕНИЯ ВОЛОС — современная формула от выпадения волос с экстрактами целебных трав Алтая.

Спрей разработан специально для укрепления и роста волос, а также для улучшения их состояния.

Не утяжеляет волосы, не требует смывания и ополаскивания.

Его активные компоненты воздействую непосредственно на волосяные фолликулы, обеспечивая комплексный эффект, и способствуют:

• уменьшению выпадения волос; *

• улучшению питания и возвращению жизненной силы и красоты волосам;

• увеличению объема и появлению здорового блеска;

• нормализации уровня салоотделения кожи головы.

Как работают ингредиенты:

Экстракты алтайских трав (ромашки, календулы, тысячелистника) придают волосам блеск, упругость, снижают повышенную жирность прикорневой зоны, стимулируют рост и укрепление волос, обладают противовоспалительным действием.

Липосентол-гидро — комплекс провитаминов В5, витаминов С и РР, гиалуроновой кислоты и фруктовых кислот. Обладает увлажняющим и регенерирующим эффектом, питает кожу.

Таурин — выступает в роли строительного материала для структурных компонентов волоса. Препятствует деформации и сжатию волосяной луковицы — процессу, который является причиной роста слабых, тонких волос и их преждевременного выпадения.

L-карнитин — витаминоподобное вещество, которое значительно ускоряет деление клеток, необходимых для роста волос, замедляет старение клеток.

Биотин Плюс (содержит серу) можно назвать витамином красоты. Регулирует содержание жира в коже, обеспечивая блеск и красивый внешний вид волос.

Витамин В6 — способствует профилактике образования перхоти и предотвращению сухости кожи головы.

Аминофиллин — оказывает стимулирующее действие на волосяные луковицы и кожу головы, улучшая кровоснабжение.

Лауриновая кислота — мягко питает, обволакивая волосы на уровне кутикулы.

Ментол обладает мягким охлаждающим и освежающим действием. Улучшает кровообращение.

Аптечные витамины за копейки, которые скрывают. Узнайте правду и рецепты

В домашние маски добавляйте аптечные витамины. Результат получается, как после салонных процедур или очень дорогих масок. А цена у них – копейки! Рассказываем…

Витамин А (Ретинола Ацетат)

Обеспечивает упругость и прочность тканей, обладает восстанавливающими свойствами, придает силу и блеск волосам.

Если волосы ломкие, тусклые, секутся, растворите в 1-2 ст.л. льняного масла 3-5 капсул витамина, 4-5 капель масла иланг-иланга, вотрите средство в кожу головы и распределите по всем волосам. Через час смойте с шампунем. Применяйте 1 раз в неделю в течение месяца.

Витамин В1

Увлажняет кожу, повышает ее тонус, разглаживает морщинки.

Если кожа потеряла упругость, сухая, шелушится, добавьте в 2-3 ст.л. нежирной сметаны 1 ампулу витамина В1, 1 ч.л. сока алоэ и нанесите смесь на лицо минут на 15. Делайте маску два раза в неделю, в течение пары месяцев.

Витамин В2

Стимулирует обмен веществ в клетках, восстанавливая их.

При появление на губах болезненных трещинок осторожно массируйте их по 5-10 минут таким составом: 0,5 ч.л. натурального меда, 3-4 капли витамина В2 и 5 капель репейного масла. Делайте так каждый день, пока кожа не заживет.

Витамин В3 или РР (никотиновая кислота)

Снимает воспаление, улучшает сопротивление кожи ультрафиолету. Чтобы повысить сопротивляемость кожи активным солнечным лучам, смешайте 3-4 ст.л. кефира, 1 ампулу никотиновой кислоты с 1 ч.л. оливкового масла и нанесите маску на кожу. Смойте через 15 минут. Такая маска полезна и для волос. Нанесите состав на волосы и подержите 40 минут под шапочкой. Курс 12 процедур через день.

Витамин В6 (пиридоксин)

Регулирует работу потожировых желез, сужает поры. Когда беспокоит повышенная потливость, появляется жирный блеск и прыщи на лице. Поможет маска из 1 ст.л. косметической глины, 3-4 ст.л. молока и 1 ампулы витамина В6. Оставьте на лице на 20 минут и смойте. Применяйте 2-3 раза в неделю. Курс 12-14 процедур.

Витамин В12 (цианокобаламин)

Стимулирует подкожное кровообращение, поддерживает тонус мышц. Чтобы подтянуть овал лица, разгладить морщинки на лбу, возле глаз и у краев рта, применяйте лифтинг – маску: 1 ст.л. порошка ламинарии, 2-3 ст.л. минеральной воды, 1 ампула витамина В12, по 1 ч.л. глицерина и лимонного сока. Нанесите маску на лицо на 15 минут. Проведите курс из 15 таких процедур, делая через день, два.

Витамин С (аскорбиновая кислота)

Обладает высокими антиоксидантными свойствами, поддерживает упругость кровеносных сосудов. При наличии сосудистых звездочек соедините в чашке 1 ст.л. порошка бодяги, 1 ампулу витамина С, 3-4 ст.л. сока листьев лопуха и 1 ч.л. яблочного уксуса. Нанесите состав на лицо, избегая области вокруг век и губ. Оставьте на 10 минут. Применяйте маску раз в 4 дня на протяжении 2 месяцев.

Витамин Е (токоферол)

Активизирует лимфодренаж, устраняет отечность, продлевает молодость. Если ваше лицо выглядит одутловатым, серым, прогрессируют возрастные изменения, используйте маску из яичного желтка, 1 ст.л. мякоти банана и 1 ампулы витамина Е. Делайте через день, два по 15-20 минут, в течение месяца.

Правила применения

Следует понимать, что синтетические витамины аллергены. Пред применением убедитесь в отсутствии индивидуальной непереносимости. Каждый состав тестируйте на коже с внутренней стороны запястья или у локтя. Если через полчаса после нанесения раздражения не появятся, пробуйте добавлять витамин в маску и применять по назначению.

admin

автор статьи
admin

Любое использование фото/видео/текстовых материалов без письменного разрешения редакции запрещено. Запрещено публиковать любые фрагменты материала, фотографии и видеоматериалы в пабликах ФБ, ВК, ОК Instagram.

13 самых эффективных витаминов в ампулах, которые подарят волосам силу и здоровье

Каждая женщина желает иметь красивые и сильные волосы. Чтобы придать блеск и здоровье шевелюре, избавиться от секущихся кончиков, женщины постоянно находятся в поиске чудодейственных рецептов. Многие обращаются в салоны красоты, покупают специализированные средства по уходу за волосами. Существует прекрасное средство, действие которого сопоставимо с эффектом салонных процедур. Это витамины для волос в ампулах. В чем же особенность витаминотерапии?

Здоровье волос зависит от витаминов

Полезные витамины для волос: советы по использованию, рецепты масок

Получаемых из пищи витаминов недостаточно для укрепления волос и устранения ломкости. Витамины в ампулах можно применять для изготовления масок, часто их добавляют в шампуни для мытья головы. Есть витамины для внутримышечных инъекций и для непосредственного применения на кожу головы. Главное — знать, как действуют разные микроэлементы, и в каких пропорциях их необходимо смешивать.

Каким действием обладают витамины: Ретинол и другие

Ретинол делает локоны объемными, ускоряет рост волосяных луковиц, препятствует возникновению перхоти. Жидкий витамин а укрепляет корни, оберегает волосы от вредного влияния окружающей среды, благодаря чему они стают менее сухими и ломкими. Бета-каротин эффективен при замедленном росте и выпадении волос. Действие ретинола усиливается при добавлении витамина Е.

Аскорбиновая кислота

Важнейшим веществом для укрепления иммунитета является аскорбиновая кислота. Витамин с в ампулах
необходим для выработки коллагена, восстановления тканей. Известно благоприятное воздействие витамина С на кожу лица: он способствует улучшению цвета кожи, устранению морщин. Аскорбиновая кислота оживляет локоны, придает им блеск и силу, питает корни. Надо отметить, что организм не вырабатывает этот элемент, он должен поступить извне. Признаки нехватки аскорбиновой кислоты отражаются и на волосах: они стают тусклыми и безжизненными.

Токоферол

Данное вещество является сильным антиоксидантом, его смело можно назвать «витамином молодости». Токоферол улучшает кровообращение и обмен веществ, предупреждает преждевременное старение, защищает от атеросклероза. Воздействуя на локоны, витамин е увлажняет их и укрепляет по всей длине, устраняет тусклый вид. Действие вещества усиливается при сочетании с ретинолом.

Витамин PP

Это очень эффективное средство при выпадении волос, так как оно способствует пробуждению спящих волосяных луковиц. Также, никотиновая кислота способствует росту волос, делает их сильными.

Витамин D

Придает локонам здоровье и силу, ускоряет их рост, устраняет перхоть. Микроэлемент содействует усвоению кальция человеческим организмом.

Витамины группы В

Витамины данной группы просто незаменимы для женщин, которые хотят иметь для красивые локоны Почти все микроэлементы, относящиеся к группе B, защищают женскую шевелюру от чрезмерной потери волос:

Витамин B1
защищает локоны от отрицательного внешнего воздействия, придает им природное сияние, восстанавливает поврежденную структуру. Признаки нехватки в организме: ломкость, тусклость, безжизненность волос.
В2 помогает бороться с перхотью, устраняет шелушение.
В3 используется при выпадении волос, признак дефицита вещества в организме − ранняя седина.
В6 активизирует развитие волосяных луковиц, делает локоны сильнее, уменьшает вероятность появления перхоти.

В7 значительно улучшает состояние волос. О недостатке этого полезного вещества свидетельствует ломкость ногтей, выпадение и потускнение волос, нездоровый цвет кожи. Для большей эффективности биотин в ампулах вводится внутримышечно: это обеспечивает поступление максимального количества полезных веществ.
В8 укрепляет локоны, ускоряет их рост.
В9 способствует регенерации клеток, это хорошее средство при седине и облысении.
В12 оказывает следующее действие: активизирует обмен веществ в клетках, устраняет проявление перхоти, уменьшает выпадение. Цианокобаламин для волос рекомендуется добавлять в маски, так как поступаемые с пищей микроэлементы плохо усваиваются.

Прочитав информацию о том, как определенные группы витаминов влияют на волосы, можно выбрать из них именно те, которые способны решить проблему. Найти препараты в ампулах не сложно: они продаются в аптеках.

Что входит в состав ампул с жидкими витаминами?

Чаще всего, содержимое ампул состоит из витаминов, протеинов и кератина. В некоторых препаратах могут присутствовать дополнительные компоненты. Перед применением необходимо внимательно прочитать состав. Действие составляющих компонентов направлено на восстановление баланса волосяного покрова: если локоны сухие − происходит интенсивное увлажнение, а жирные волосы избавляются от повышенного салоотделения.

В составе масок жидкие витамины для волос благотворно воздействуют на локоны: они стают шелковистыми, объемными, легко расчесываются. Кератин устраняет секущиеся кончики, коллаген заживляет микротрещины. Перед использованием витаминов в ампулах, рекомендуется ознакомиться с правилами использования препаратов. Специалисты не советуют применять микроэлементы в чистом виде, лучше всего − добавлять их в шампуни и в маски. Так действующие компоненты глубже проникнут в каждый волосок.

Правила использования жидких витаминов

Витамины должны быть правильно подобранными в зависимости от проблемы волосяного покрова, не желательно делать более 4 процедур в месяц. Содержимое открытой ампулы надо использовать сразу же, не стоит смешивать более трех видов препаратов. Перед использованием ампулу необходимо встряхнуть.
Следует очень осторожно вскрывать ампулу с содержимым, чтобы не порезаться. Обычно в комплекте идет специальная пилочка. Немного подпилив ампулу, надо накрыть ее кусочком бинта или ватой и двумя пальцами отломить.
Важно соблюдать указанную в рецепте дозировку препаратов. Избыток полезных веществ может плохо влиять.
Чтобы получить желаемый результат и закрепить его, витамины в ампулах используются курсами. После одноразового применения невозможно добиться стойкого результата.
Во время сна происходит активное восстановление организма, для максимального эффекта маски с полезными веществами оставляют на всю ночь.
Маски наносятся непосредственно на кожу головы, что содействует хорошему проникновению всех компонентов в эпидермис. Втирание состава в кожу производится очень осторожно, иначе можно повредить ослабленные корни.
Для улучшения проникновения микроэлементов в кожу головы поверх маски надевают резиновую шапочку (можно заменить целлофановым пакетом) и укутывают полотенцем.
Маску надо держать на голове в течение часа, если в рецепте не указано другое время. Перед первым использованием делают тест на чувствительность.

Допустимое сочетание витаминов

Для того, чтобы польза от использования препаратов в ампулах была максимальной, важно знать, какие микроэлементы можно сочетать, а какие противопоказано смешивать. Сразу надо отметить, что препараты для внутривенного введения нельзя смешивать. Далее рассказывается о том, какие полезные вещества допускается комбинировать, а какие нет:

Витамин В12 хорошо сочетается с В6, это средство уменьшает потерю волос.
Противопоказано соединять микроэлементы В1, В3, В6, В2, так как происходит нейтрализующая реакция.
Витамин С нельзя сочетать вместе с витаминами группы В. Он быстро утрачивает свои качества при открытии ампулы, поэтому его следует вводить в самом конце приготовления маски.
Допустимые сочетания: масляные растворы токоферола и ретинола и аскорбиновая кислота; витамины В6 и В12.

Приготовленные маски наносятся перед мытьем головы, затем одевается защитная пленка и согревающее полотенце. Маски выдерживаются в течении 30-60 минут.

Полезные маски с витаминами В1, В6 и В12 для силы и густоты волос

Укрепляющая маска. Соединить 2 ампулы В1, 1 ампулу экстракта алоэ и 1 ч.л. настойки прополиса. Основные компоненты маски активизируют рост волосков, препятствуют облысению.
Маска с облепиховым маслом решает проблему обильного выпадения локонов. Необходимо взять 1 яичный желток, по 1 ампуле пиридоксина и цианокобаламина, 1 ч.л. облепихового масла.
Маска с репейным маслом. Разогретое масло (2 ст.л.) смешать с 1 ампулой В6.

Рецепты масок для волос, в которых основной компонент витамин PP

Взять по 1 ч.л. сухих трав ромашки, крапивы и шалфея. Залить 250 мл кипятка и дать настояться 40 минут. К 2 ст.л. отвара прибавить 2 ампулы микроэлемента PP, нанести на волосы.
Немного подогреть репейное масло. Втереть 4 ампулы никотиновой кислоты в волосяные фолликулы, поверх нанести теплое масло.

Применение витаминов в ампулах в сочетании с соком алоэ

Понадобятся такие ингредиенты: по 1 ампуле тиамина и пиридоксина, 1 ст.л. меда, 2 ч.л. сока алоэ, 1 яичный желток.
Взять по 1 ампуле витаминов В12, В8, PP, экстракта алоэ, по 5 капель ретинола и токоферола в масле, 2 ст.л. бальзама для волос, перемешать. Голову вымыть шампунем, немного подсушить, затем волосы покрыть готовой смесью, держать 1 час. Маска преображает волосы: они становятся шелковистыми, мягкими, перестают выпадать.

Добавление витаминов в шампунь

Витамины в ампулах часто доливают в шампуни. Важно применять шампуни с натуральными ингредиентами, которые не содержат вредных добавок. Постоянное использование косметических средств с консервантами и силиконами делает волосы ломкими и безжизненными.

Как пользоваться таким шампунем? Мытье головы надо будет повторить дважды: сначала вымыть голову как обычно, затем нанести шампунь с полезными веществами на 5-10 минут, чтобы полезные вещества успели проникнуть в каждый волосок, затем все смыть водой.

Какие витамины следует добавлять в шампуни?

Несколько капель токоферола, ретинола или «Аевита» добавить в одноразовую порцию косметического средства.
Витамины В12, В1, В6, никотиновая кислота. Содержимое капсул не следует выливать в бутылку с шампунем, так как все полезные вещества быстро улетучиваются. Жидкие препараты добавляются перед мытьем головы. Если переборщить с дозировкой препарата — волосы начнут выпадать.

Отзывы женщин, которые проверили на своих волосах действие жидких витаминов

Маски с ретинолом − это настоящая бомба! Волосы блестят, пропала перхоть. Средство доступное и эффективное.
1-2 раза в неделю готовлю маску: смешиваю репейное масло и ампулу цианокобаламина, держу 1-2 часа. Мои волосы стали мягкими, блестящими, начали быстро расти.
Поделюсь копеечным способом по уходу за шевелюрой. Я его использую уже 2 месяца, волосы реально ожили, стали здоровыми, ускорился рост. Покупаете в аптеке ампулы В12 и В6, моете голову, подсушиваете и втираете в кожу по 1 ампуле. Смывать не надо. Советую всем.
Всем привет. Я делаю так: в мисочку с шампунем прибавляю по 1 ампуле В1, В6, В12, 5 капель масла жожоба. Я довольна, волосы блестящие, объемные, быстрее растут.

Примените витамины для ваших волос и вы удивитесь какой будет эффект

Берегите свои локоны!

Как несколько простых изменений образа жизни могут облегчить вашу нервную боль: Дэвид Беркауэр, DO: Физическая медицина и реабилитация

Говоря прямо, нервная боль может ослабить вас, если вы не получите лечения. Любое количество факторов может вызвать вашу боль, в том числе:

Диабет, инсульт, рассеянный склероз, рак или другое серьезное заболевание
Травма головного или спинного мозга
Плохое кровоснабжение нервов
Синдром запястного канала или ишиас
Опухоли, которые давят на нервы и вызывают боль

Если вы страдаете нервной болью или невропатией, докторДэвид Беркауэр из Berkower Pain & Spine Rehabilitation в Пембрук-Пайнс, Флорида, может помочь.

Лучшая диета для нервов

витаминов группы В защищают нервные клетки. Витамин B1 (тиамин) дает вашим нервам энергию для функционирования, а витамин B6 снимает нервную боль и правильно передает нервные импульсы. Витамин B12 регенерирует нервы, защищая их от повреждений.

Дефицит витаминов B12 или B1 может частично быть причиной нервной боли. Доктор Беркауэр может помочь вам спланировать здоровую нервную диету, которая включает свежие фрукты и овощи, нежирные белки и цельнозерновые продукты, чтобы компенсировать любой дефицит витаминов и позволить вашему телу восстановиться.

Дополнительные диетические изменения

Удалите глютен или, по крайней мере, сосредоточьтесь на более здоровых зерновых без глютена, таких как киноа, амарант, теф и сорго.
Примите участие в веганской диете. Уменьшение или исключение мяса, сыра и молока должно помочь сбалансировать уровень сахара в крови, что может успокоить нервную боль.
Пейте много воды, чтобы питательные вещества циркулировали.
Умерьте потребление сахара и полностью откажитесь от искусственных подсластителей.
Удовлетворите сладкоежек фруктами с низким гликемическим индексом, такими как яблоки, абрикосы, груши, апельсины, клубника, виноград и сливы
Включите овощи, такие как брокколи, цветная капуста, сельдерей, огурцы, грибы и т. Д.
Наслаждайтесь зелеными листовыми салатами с полезными жирами, такими как оливковое масло, дикая рыба и авокадо, которые богаты нервно-строительными и обезболивающими омега-3 жирными кислотами.
Добавка с витаминами группы B, альфа-липоевой кислотой (ALA), витамином E и витамином B3 (ниацин), которые имеют решающее значение для здоровья нервов.
Оживите свою жизнь, добавив в пищу противовоспалительный куркумин и куркуму. Они обладают сенсационным вкусом и могут уменьшить нервную боль.

Периферическая невропатия

Периферическая невропатия, форма нервной боли, часто поражает пациентов с диабетом.Плохая коммуникация внутри нервов может вызвать изнуряющую колющую, покалывающую и жгучую боль, в конечном итоге повреждая нервы. Диабет часто является результатом плохого питания и / или ожирения. Доктор Беркауэр может посоветовать правильные питательные вещества, продукты и упражнения, которые помогут справиться как с вашим состоянием, так и с болью.

Периферическая невропатия вызывает у вас боль?

Помимо боли, люди с периферической невропатией могут испытывать:

Слабость мышц
Проблемы координации и баланса
Чувствительность к касанию
Головокружение

Помимо диабета, на развитие периферической невропатии влияют различные факторы риска, в том числе:

Аутоиммунные заболевания, такие как ревматоидный артрит или волчанка
Фибромиалгия
Физические травмы в результате несчастных случаев и травм
Вирус Эпштейна-Барра, болезнь Лайма и другие хронические инфекции
Воздействие токсичных веществ, таких как свинец и ртуть

Особенно важно вылечить периферическую невропатию раньше, чем позже, когда ее будет гораздо труднее вылечить.Обращайтесь с любыми проблемами и вопросами к доктору Берковеру, который поможет вам встать на путь благополучия.

Простые изменения в образе жизни могут избавить вас от боли

Помимо диеты, доктор Берковер рекомендует внести некоторые базовые изменения в образ жизни, например, избегать повторяющихся движений, увеличивать количество легких или умеренных упражнений и не оставаться в сидячем положении в течение длительного времени. Не забывайте регулярно вставать от компьютера, чтобы размяться и передвигаться. Доктор Берковер предлагает специальные упражнения, которые скорее помогают, чем вредят.

Если вы курите, бросьте. И не переусердствуйте с алкоголем.

Мы здесь, чтобы помочь

Узнайте, как несколько незначительных изменений могут сильно повлиять на вашу нервную боль. Если вас беспокоит боль или другие хронические заболевания, позвоните нам по телефону 954-430-9972, чтобы договориться о консультации, или запишитесь на прием к доктору Берковеру онлайн сегодня. Вы также можете отправить нам сообщение здесь, на сайте.

Витамин B — и почему он важен

Как один из самых важных витаминов, витамины B также вызывают наибольшую путаницу, потому что их очень много.Будь то фолиевая кислота (не путать с фолиевой кислотой) или B12, каждый из них выполняет очень разные функции. Мы попросили д-ра Фрэнка Липмана из оздоровительного центра Eleven Eleven Wellness Centre объяснить разницу и рассказать, как лучше всего использовать каждую из них.

Вопросы и ответы с доктором Фрэнком Липманом

квартал

Существует так много различных компонентов витамина B (B6, B12 и т. Д.) — почему это так сложно?

Вероятно, это связано с тем, что они часто работают в организме коллективно и индивидуально и присутствуют в одних и тех же продуктах.Так что становится немного сложно отличить одно от другого. Но они представляют собой группу из восьми химически различных витаминов, каждый из которых выполняет уникальные функции с определенными преимуществами. Они помогают преобразовывать нашу пищу в энергию и играют важную роль в различных аспектах клеточного метаболизма, помогая вам оставаться бодрыми в течение дня. Но они также важны для поддержания здоровья кожи и волос, уравновешивания настроения и снятия стресса, способствуют ясности ума и сосредоточенности, поддерживают здоровье сердечно-сосудистой системы, предотвращают мигрень и укрепляют иммунитет.

квартал

Все ли витамины группы В одинаково важны?

Два самых важных компонента B — это B12 и фолиевая кислота (витамин B9).

B12 имеет решающее значение для правильного функционирования вашего мозга и нервной системы, а это означает, что он играет жизненно важную роль в ясности ума и сосредоточенности, а также в эмоциональном равновесии и спокойствии. Он также важен для передачи нервных сигналов и нормальной нервной функции в целом. Недостаток B12 делает ваше тело более уязвимым к физическому и эмоциональному стрессу — к износу, который мы обычно связываем со старением, но который я считаю скорее отсутствием надлежащего функционирования.

Фолиевая кислота — ключевой защитник от мозгового тумана, раздражительности, депрессии и других реакций на физический и эмоциональный стресс. Он помогает восстанавливать ДНК, а также обладает значительными антивозрастными свойствами. Он также важен для беременных женщин, поскольку его недостаток может вызвать серьезные неврологические врожденные дефекты. Витамин B12 работает вместе с фолиевой кислотой в синтезе ДНК и красных кровяных телец.

Примечание. Хотя фолиевая кислота и фолиевая кислота взаимозаменяемы, важно понимать разницу.Фолиевая кислота — это синтетический тип витамина B, используемый в добавках и обогащенных продуктах, в то время как фолиевая кислота — это естественная форма, содержащаяся в пищевых продуктах.

Другой важный B — B6. Он участвует в более чем 100 клеточных реакциях по всему телу и помогает поддерживать бесперебойную работу различных функций организма.

квартал

Каковы последствия низкого уровня витамина B? Какие симптомы?

Симптомы дефицита зависят от того, какого типа витамина B вам не хватает.Самый распространенный дефицит — это дефицит B12, который на самом деле довольно распространен. Это вызывает вялость, утомляемость, слабость, анемию, потерю памяти, неврологические и даже психиатрические проблемы.

Но дефицит витамина B может вызывать всевозможные проблемы, начиная от головных болей, раздражительности и спутанности сознания до анемии или ослабленной иммунной системы и заканчивая усталостью. Симптомами могут быть кожная сыпь, сухость кожи, трещины в уголках рта, частые синяки и раны, заживление которых требует длительного времени.Также могут возникать мышечная слабость, нарушение координации, онемение или покалывание в пальцах рук и ног.

квартал

Какие продукты хороши для витамина B?

Витамины

B особенно сконцентрированы в мясе, таком как индейка, тунец и печень. Но другие хорошие растительные источники витамина B включают бобовые, цельнозерновые, картофель, бананы, перец чили, пищевые и пивные дрожжи, темпе и патоку.

Вероятно, одна из самых важных вещей, которые вы можете сделать с точки зрения питания, чтобы получить витамины B из своего рациона, — это есть ферментированные продукты.Кишечные бактерии синтезируют и поставляют некоторые из витаминов группы В, поэтому, если вы не едите ферментированные продукты, такие как кимчи, квашеная капуста или кефир, принимайте хорошие пробиотики ежедневно.

Поскольку витамин B12 содержится в основном в мясных и молочных продуктах, строгие вегетарианцы и веганы особенно подвержены риску его дефицита. Витамин B9 (фолиевая кислота) содержится во многих продуктах, от мяса до злаков и цитрусовых. Витамин B6 содержится в рыбе, птице, печени, картофеле и не цитрусовых фруктах.

квартал

Можно ли употреблять слишком много витаминов группы В?

витаминов группы B водорастворимы и выводятся с мочой, так что их просто нужно мочиться.Побочные эффекты возникают нечасто, хотя прием больших доз некоторых витаминов B может вызвать временную тошноту, бессонницу и беспокойство, но они скоро проходят. Исключением является B6. Высокие дозы B6 в течение длительного периода могут вызвать неврологические проблемы.

квартал

Считается, что витамины группы В важны для лечения болезни Альцгеймера и потери памяти — почему именно так?

Вероятно, это связано с тем, что высокие уровни гомоцистеина аминокислоты связаны с уменьшением размеров мозга и повышенным риском болезни Альцгеймера, а витамины B6, B12 и фолиевая кислота, как известно, снижают уровень гомоцистеина.

квартал

Важен ли ежедневный прием дополнительных витаминов группы В? Что это улучшит? Сколько стоит подходящая сумма?

Вы получаете несколько витаминов группы В в составе поливитаминов, но, учитывая, что витамины группы В эффективно защищают ваш разум и тело от всех видов стресса, я рекомендую принимать больше. Я рекомендую всем измерять уровень B12, особенно тем, кто употребляет слишком много алкоголя, является вегетарианцем, принимает препараты, подавляющие кислоту (например, нексиум), старше 60 лет, страдает воспалительным заболеванием кишечника или вообще имеет проблемы с пищеварением.Я постоянно удивляюсь, как много людей страдают дефицитом и хорошо справляются с инъекциями B12 или пероральными добавками.

Моя рекомендуемая минимальная суточная доза для трех важных витаминов группы B для здоровых людей составляет: 400-800 мкг метилированной фолиевой кислоты или фолиевой кислоты, 400-800 мкг витамина B12 (в форме метилкобаламина) и 50-75 мг витамина B6. Людям с высоким уровнем гомоцистеина или любым из упомянутых выше состояний может потребоваться гораздо больше.

квартал

Что такое метилирование и почему важно принимать метилированные формы фолиевой кислоты и B12?

Метилирование — это процесс, который ваши клетки выполняют миллиарды раз в секунду.Без надлежащего метилирования ваше тело не сможет должным образом реагировать на стресс — ни на физические факторы стресса, такие как токсины и сложные продукты, ни на факторы психологического стресса, такие как жизненные проблемы и давление. В результате вы будете более уязвимы к хроническим заболеваниям, включая сердечно-сосудистые заболевания, диабет, синдром хронической усталости, аутоиммунные состояния, болезнь Альцгеймера и другие неврологические проблемы. Неправильное метилирование также делает вас более уязвимыми для снижения функций, которое мы обычно связываем со старением.

Считается, что около половины из нас имеют какой-либо тип генетической мутации, затрудняющей метилирование, поэтому ищите витамины группы B с метилированными формами B12 и фолиевой кислоты или ищите естественный фолат для получения максимальной пользы. Вы можете пройти генетическое тестирование (тест на гены MTHFR), чтобы узнать, есть ли у вас один из этих дефектных генов.

квартал

Является ли капельное введение витамина B внутривенно — то, что стало так популярно в наши дни, — лучшим способом получить витамин B?

Типичный «коктейль Мейера», который представляет собой обычную внутривенную инъекцию витаминов, содержит смесь комплекса B.Убедитесь, что вы получаете метилированный B12 и фолиевую кислоту внутривенно. Сейчас они стали довольно популярными, но я обычно использую их для своих пациентов, которые устали, заболели «простудой» или «гриппом» или которым просто нужно подбодрить.

——————

Доктор Фрэнк Липман получил начальное медицинское образование в Южной Африке и эмигрировал в США в 1984 году. Он стал сертифицированным специалистом по внутренним болезням после того, как работал главным медицинским резидентом в последний год своей ординатуры в больнице Линкольна в Нью-Йорке. .Все больше и больше осознавая как сильные, так и слабые стороны своего обучения, он начал изучать акупунктуру, китайскую медицину, функциональную медицину, питание, фитотерапию, биологическую обратную связь, медитацию и йогу. Он начал понимать, что поляризация между западными модальностями и другими философиями исцеления просто сводит на нет положительные атрибуты обоих. Он видел, что истинное исцеление заключается в сочетании этих двух вещей. Теперь он практикует свое уникальное сочетание того, что он называет «Хорошей медициной», объединяя все системы, которым он обучался.

Доктор Липман является автором трех книг: Новые правила здоровья, Полное обновление: 7 ключевых шагов к сопротивлению, жизнеспособности и долгосрочному здоровью, и Возрождение: перестань чувствовать себя потраченным и начни снова жить ( ранее выпущенный как Потрачено: конец истощению и снова чувствую себя великолепно ). Он активно участвует в некоммерческой работе в Южной Африке и читает лекции по всему миру на темы, связанные со здоровьем.

Взгляды, выраженные в этой статье, направлены на то, чтобы выделить альтернативные исследования и побудить к разговору.Они представляют собой точку зрения автора и не обязательно отражают точку зрения Goop, и предназначены только для информационных целей, даже если и в той степени, в которой они содержат советы врачей и практикующих врачей. Эта статья не является и не предназначена для замены профессиональных медицинских рекомендаций, диагностики или лечения, и на нее нельзя полагаться при получении конкретных медицинских рекомендаций.

Границы | Витамин B12 усиливает восстановление нервов и улучшает функциональное восстановление после черепно-мозговой травмы, ингибируя нейронное повреждение, вызванное стрессом ER

Представления

Черепно-мозговая травма (ЧМТ) обычно возникает после дорожно-транспортных происшествий у взрослых или перинатальной асфиксии у новорожденных, что вызывает отек мозга с повышением внутричерепного давления и последующее снижение церебральной перфузии, ведущее к ишемии (Fink et al., 2012). Предыдущие терапевтические подходы были сосредоточены на защите гематоэнцефалического барьера на ранней стадии травмы для смягчения таких повреждений, как нарушение ионного гомеостаза, вторичный отек мозга, воспаление и образование свободных радикалов (Mayer et al., 2013; Katz et al. ., 2015; Ma et al., 2017). Процессы восстановления после TBI сильно ограничены из-за неспособности полностью пополнить популяцию нейронов (Sun, 2014). Более того, дегенерация и некроз аксонов также являются основным патологическим событием острой ЧМТ (Zhang et al., 2015). Следовательно, подавление апоптоза нейронов и стимуляция регенерации аксонов имеют большое значение в обеспечении функционального восстановления после ЧМТ (Sun, 2014; Zhang et al., 2016).

Стабильность микротрубочек является основным фактором, определяющим рост аксонов и поляризацию нейронов во время образования аксонов (Murillo and Sousa, 2018). Предыдущее исследование продемонстрировало, что введение фактора роста фибробластов 13 (FGF13) поддерживает стабильность микротрубочек и способствует образованию аксонов и поляризации нейронов после повреждения спинного мозга (Li et al., 2018). Белки, стабилизирующие микротрубочки (MSP), такие как белки цитоскелета, пересекают клетки и транспортируют питательные вещества для обеспечения целостности функции клеток (Nogales, 2000). Члены семейства MSP, такие как белки, связанные с микротрубочками (MAP), тау-белок и двойной кортин (DCX), могут способствовать сборке микротрубочек, стабилизировать микротрубочки и играть ключевую роль в управлении миграцией нейронов в кору головного мозга и регенерации аксонов на ранней стадии. миграции нейронов (Takei et al., 2000; Kapitein and Hoogenraad, 2015; Brunden et al., 2017). Таким образом, лекарство, которое снижает апоптоз нейронов и способствует стабильности микротрубочек, может представлять собой многообещающий подход для клинического лечения ЧМТ (Brunden et al., 2017; Gao et al., 2018).

Витамин B ₁₂ (Мекобаламин, MeCbl) — важный микронутриент, который необходим во многих биологических процессах (Rathod et al., 2016). Он считается коферментом в метаболизме фолиевой кислоты и биосинтезе нуклеотидов, что делает его решающим в метаболизме жирных кислот и некоторых аминокислот и нормальной функции нервной системы (Field et al., 2018). Кроме того, дефицит витамина B ₁₂ приводит к дефициту метионина, что приводит к синтезу красителей как фосфолипидов, так и миелина (Gröber et al., 2013). В настоящее время комбинированная терапия витамином B ₁₂ широко комбинируется и применяется в клинических условиях у пациентов с нервными заболеваниями. Сообщалось, что системное введение витамина B ₁₂ способствовало процессу восстановления после повреждения периферических нервов у экспериментальных крыс (Hobbenaghi et al., 2013). Кроме того, недавно было показано, что витамин B ₁₂ является поглотителем супероксида, способствующим росту аксонов нейрональных клеток (Chan et al., 2018). Таким образом, мы предположили, что витамин B ₁₂ может усиливать образование аксонов после TBI за счет стабилизации микротрубочек и уменьшения апоптоза нейронов.

Накопление неправильно свернутого белка в эндоплазматическом ретикулуме (ER) приводит к дисфункции ER, известной как стресс ER (Hughes and Mallucci, 2018). Недавние исследования показали, что стресс ER участвует в ряде неврологических заболеваний, включая церебральную ишемию, нейродегенеративные расстройства и болезнь Альцгеймера (Roussel et al., 2013; Hood et al., 2018). Наше предыдущее исследование показало, что ингибирование стресса ER значительно защищает от апоптоза нейронов после повреждения спинного мозга (He et al., 2017), но роль стресса ER в TBI все еще неясна. Все большее количество исследований свидетельствует о том, что витамин B ₁₂ регулирует гомеостаз ER (Sukocheva et al., 2001; Ghemrawi et al., 2013). Кроме того, сообщалось, что дефицит витамина B ₁₂ активировал пути стресса ER за счет увеличения фосфорилирования PERK и IRE1α и экспрессии ATF6 (Ghemrawi et al., 2013). Учитывая нашу предыдущую работу о стрессе ER и его участии в нервных заболеваниях, мы предположили, что витамин B ₁₂ может способствовать регенерации нервов после TBI, регулируя стресс ER.

В этом исследовании мы изучили влияние витамина B ₁₂ на регенерацию нервов после ЧМТ как in vivo , так и in vitro . Между тем, мы исследовали роль стресса ER во время лечения ЧМТ витамином B ₁₂ путем изучения изменений в апоптозе нейронов, микротрубочках, регенерации миелина и росте аксонов.

Материалы и методы

Животные

Взрослых мышей-самцов C57BL / 6 в возрасте 6–8 недель и массой 20–26 г были приобретены в Центре животных Китайской академии наук (Шанхай, Китай). Животных содержали при 12-часовом цикле свет / темнота при 21–23 ° C и обеспечивали доступ к пище и воде ad libitum . Уход и использование всех животных были одобрены этическим комитетом Медицинского университета Вэньчжоу и соответствовали руководящим принципам, установленным Китайскими национальными институтами здравоохранения.Мышей разделили на следующие четыре группы с использованием таблицы случайных чисел: группа фиктивных животных, которая получала только анестезию и трепанацию черепа: группа TBI; и две группы лечения витамином B ₁₂ (дозы 0,5 мг / кг / день и 1,5 мг / кг / день), которые получали витамин B ₁₂ внутрибрюшинно после операции.

Культура клеток и OGD / повторная оксигенация Модель

клеток PC12 были приобретены из банка клеток коллекции типовых культур Китайской академии наук, Шанхайского института клеточной биологии Китайской академии наук.Клетки PC12 были высокодифференцированными и прилипшими. Клетки культивировали с RPMI 1640 с добавлением 10% FBS, 100 Ед / мл пенициллина и 100 мкг / мл стрептомицина, а затем инкубировали в увлажненной атмосфере, содержащей 5% CO ₂, при 37 ° C. Для кислородно-глюкозной депривации (OGD) клетки инкубировали в анаэробной камере в течение 6 часов при уровне кислорода, который оставался ниже 0,5% с нормальной питательной средой или средой без FBS, а затем клетки инкубировали в течение еще 12 часов при нормальной культуре. условия.Предварительную обработку витамином B ₁₂ (200 мкМ) вводили за 2 часа до OGD. Чтобы дополнительно оценить эффект активации стресса ER во время OGD, клетки предварительно обрабатывали 4-фенилмасляной кислотой (4-PBA) (1 мМ) в течение 1 часа. Все эксперименты проводились не менее трех раз.

Хирургические процедуры

На самцах мышей с помощью контролируемого коркового воздействия (CCI) было выполнено

процедур TBI. Вкратце, всех мышей-самцов анестезировали изофлураном с помощью стереотаксиса мозга, и в середине скальпа делали разрез, чтобы обнажить череп.После удаления костного лоскута, CCI была выполнена с помощью управляемого ударного устройства со скоростью 4 м / с, глубиной 1 мм и продолжительностью воздействия 150 мс (Impact One ^TM Stereotaxic Impactor, Leica, Милан, Италия) . В послеоперационном периоде разрез зашили и обработали местным антибиотиком (натриевая соль цефазолина). Мышей помещали на грелку при 37 ° C, чтобы они оправились от анестезии. Все эксперименты проводились с максимальным сокращением количества используемых животных и их страданий.

Управление по лекарствам

Витамин B ₁₂ (V2876, Sigma) и 4-PBA (P21005, Sigma) использовались в качестве лекарств в этом исследовании. Витамин B ₁₂ растворяли в физиологическом растворе в виде исходного раствора 150 мг / мл. Мышей лечили витамином B ₁₂ в дозе 0,5 мг / кг или 1,5 мг / кг путем внутрибрюшинной инъекции через 1 день после травмы в течение 2 недель подряд. 4-PBA (100 мг / кг) вводили перед лечением витамином B ₁₂ посредством внутрибрюшинной инъекции. Каждый препарат был отфильтрован по 0.Мембрана для микрофильтрации 2 мкм перед инъекцией.

Содержание воды в мозге

Мышей декапитировали под глубокой анестезией и перфузией через 24 часа после индукции TBI. Обонятельные луковицы и стволы головного мозга были удалены из их головного мозга. Затем мозг разделили на два сегмента: правое полушарие и левое полушарие. Каждую часть мозга немедленно взвешивали для определения сырого веса. Образцы сушили при 72 ° C в течение 72 ч для получения сухой массы. Содержание воды в мозге рассчитывали следующим образом: [(влажный вес — сухой вес) / влажный вес] × 100%.

Оценка нейроповеденческого поведения Гарсиа

Согласно шкале нейроповеденческих показателей Гарсиа, мышей в каждой группе оценивали на 1-й, 7-й и 14-й день после ЧМТ. Восстановление функции нервов после ЧМТ наблюдали двойным слепым методом. Вкратце: (1) спонтанная активность (0 ≤ 3 балла). (2) симметричное движение конечностей (0 ≤ 3 балла). (3) разгибание передних конечностей (0 ≤ 3 балла). (4) лазание (0–3 балла). (5) реакция туловища (0 ≤ 3 балла). (6) реакция щупалец (0 ≤ 3 балла). (7) реакция бокового вращения (0 ≤ 3 балла).

Препарат ткани

Животных анестезировали изофлураном в определенные моменты времени после TBI. Для иммунофлуоресцентного окрашивания ткани мозга вырезали, после фиксировали 4% параформальдегидом (PFA) в течение 12 часов, заливали парафином, разрезали на 5-миллиметровые срезы и помещали на предметные стекла для последующего окрашивания. Для вестерн-блоттинга сегмент мозга препарировали и сразу хранили при -80 ° C. Ткани животных лизировали буфером для лизиса RIPA (50 мМ Трис, 150 мМ NaCl, 1% Triton X-100, 1% дезоксихолат натрия, 0.1% SDS, 5 мМ ортованадат натрия, 5 мМ фторид натрия, 1 мМ и EDTA, pH 7,4) с добавлением 10 мкл / мл коктейля ингибиторов протеазы (GE Healthcare Biosciences, Питтсбург, Пенсильвания, США). Образцы гомогенизировали с использованием механического разрушения и ультразвукового разрушения клеток (30 с / раз в три раза). Лизаты тканей инкубировали при 4 ° C в течение 15 мин. Супернатанты собирали после центрифугирования при 12000 об / мин при 4 ° C в течение 15 минут.

Эксперимент на животных

Окрашивание Luxol Fast Blue (LFB): срезы депарафинизировали, промывали диметилбензолом I, диметилбензолом II, абсолютным этиловым спиртом I, абсолютным этиловым спиртом II, 95% этанолом, 90% этанолом, 80% этанолом, 70% этанолом и дистиллировали. воды, а затем инкубировали в растворе LFB (0.01% в 95% этаноле) в течение ночи при 60 ° C. Ткани серого и белого вещества были дифференцированы путем погружения предметных стекол в 0,05% раствор карбоната лития на 5-10 с с последующими 2 сменами 70% этанола в течение 1 мин каждая, а затем промыты в дистиллированной воде. Срезы наблюдали под микроскопом, чтобы подтвердить правильную дифференциацию. Стадии дифференциации повторяли до достижения резкого контраста между окрашенным в синий цвет белым веществом и бесцветным серым веществом.

Окрашивание по Нисслю: мы депарафинизировали парафиновые срезы и окрашивали их 5% толуидиновым синим при комнатной температуре в течение 10 мин.Срезы замачивали в 95% этаноле на 2 мин, диметилбензоле на 3 мин и закрывали нейтральным бальзамом. Стекла, окрашенные по Нисслю, наблюдали с помощью микроскопа Nikon.

Окрашивание

H&E: Набор для окрашивания H&E был приобретен у Beyotime Company (Цзянсу, Китай), и экспериментальная процедура была выполнена в соответствии с инструкциями к набору.

Иммуногистохимия: парафиновые срезы депарафинизировали диметилбензолом, а затем регидратировали в градиенте спирта. После инкубации в 3% оксидоле в течение 15 минут извлечение антигена проводили в лимонной кислоте с помощью скороварки, а затем слайды охлаждали в течение 2 часов.BSA в концентрации 5% использовали для предварительной инкубации при 37 ° C в течение 30 минут, а стороны инкубировали с первичными антителами при 4 ° C в течение 24 часов. Использовали следующие первичные антитела: MBP (1: 1000, Cell Signaling Technologies, Америка). На следующем этапе предметные стекла инкубировали с вторичным поликлональным антителом HRP против кроличьего IgG (H + L) козы (1: 1000, Yeason) при 37 ° C в течение 1 часа, а затем с DAB в течение приблизительно 5 минут. Окрашенные срезы фотографировали с помощью флуоресцентного микроскопа (Nikon, Токио, Япония).

Вестерн-блот

Количество белков из тканей и клеток определяли с помощью реагентов BCA. 40 мкг белков разделяли на 12% геле и переносили на мембрану из поливинилиденфторида (PVDF) (Bio-Rad, Hercules, CA, США). Мембраны блокировали на 120 мин 5% (мас. / Об.) Молока, растворенным в 0,1% Tween-20 в TBS при комнатной температуре, а затем инкубировали в течение ночи при 4 ° C со следующими первичными антителами: Caspase12 (1: 1000, Abcam, США), IRE1α (1: 1000, Abcam, США), GRP78 (1: 1000, Abcam, США), XBP-1 (1: 1000, Abcam, США), CHOP (1: 1000, Cell Signaling Technologies, США), Ace-tubulin (1: 2000, Cell Signaling Technologies, США), Tau (1: 1000, Abcam, США), MAP2 (1: 2000, Cell Signaling Technologies, США), основной белок миелина (MBP) (1: 1000, Cell Signaling Technologies, США) и GAPDH (1: 10000, Bio-world, США).Затем мембраны трижды промывали TBST и мембраны инкубировали с вторичными антителами кролика / мыши, конъюгированными с пероксидазой, кроличьими / мышиными поликлональными антителами (1: 1000, Yeason) в течение 60 мин. Для визуализации сигналов использовали систему визуализации ChemiDoc ^TM XRS (Bio-Rad, США). Величину один использовали для анализа относительных плотностей полос, и плотности полос целевых белков были нормализованы к таковой для GAPDH. Все эксперименты повторяли не менее трех раз.

Иммунофлуоресцентное окрашивание

Клетки фиксировали 4% PFA в течение 30 мин при 37 ° C. Подготовленные тканевые срезы и клетки блокировали 5% BSA в течение 30 минут, а затем инкубировали при 4 ° C в течение ночи со следующими первичными антителами: MAP-2 (1: 500, Abcam, США), Ace-tubulin (1: 500). , Cell Signaling Technologies, США), Тир-тубулин (1: 500, Sigma Aldrich, США), GRP78 (1: 1000, Abcam, США) и MBP (1: 500, Cell Signaling Technologies, США) .Затем срезы и клетки инкубировали с ослиным вторичным антителом против мыши / кролика Alexa Fluor 594/647 (1: 1000, Abcam, США) в течение 1 ч при 37 ° C. Ядра окрашивали DAPI. Образцы получали под микроскопом Nikon ECLIPSE Ti (Nikon, A1 PLUS, Токио, Япония). Из каждого образца коры головного мозга было получено по 10 изображений случайным образом. Количественный анализ иммунофлуоресценции проводили с помощью Image J. Все эксперименты повторяли, по крайней мере, в трех экземплярах.

TUNEL Окрашивание

Набор для анализа TUNEL (40307ES20, Yeason) использовался для определения уровня повреждения ДНК.Срезы головного мозга депарафинизировали и регидратировали разностным концентрированным этанолом. После промывки PBS срезы обрабатывали 10,2 мМ натрийцитратным буфером. Срезы окрашивали смесью для маркировки Alexa Fluor 488-12-dUTP. Срезы окрашивали DAPI после промывки PBS. Изображения были получены с помощью флуоресцентного микроскопа (Olympus Inc., Токио, Япония). Для анализа подсчитывали TUNEL-положительные клетки в шести случайных полях каждой секции.

Статистический анализ

Статистически проанализированные данные были представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего (SEM).Тест Стьюдента t использовался для определения статистической значимости между двумя группами. Для сравнения трех или более групп использовали односторонний дисперсионный анализ (ANOVA) с последующим апостериорным тестом Тьюки для анализа результатов. Разница считалась статистически значимой, когда значение P было <0,05.

Результаты

Витамин B12 снижает эн-цефаледему и потерю моторных нейронов после TBI

Чтобы оценить терапевтическую роль витамина B12 в лечении ЧМТ, витамин B12 вводили внутрибрюшинно сразу после ЧМТ.Содержание воды в мозге определялось через 24 ч после ЧМТ. Содержание воды в головном мозге в группе TBI, очевидно, было увеличено по сравнению с фиктивной группой (91,91 ± 1,488 против 83,53 ± 0,7815, рис. 1A, среднее ± SEM, n = 6), а содержание в воде мозга витамина B12- количество обработанных групп с ЧМТ сократилось до различной степени по сравнению с группой с ЧМТ (86,11 ± 1,070 в группе с дозой 0,5 мг / кг витамина B12 и 85,31 ± 0,7846 в группе с дозой витамина B12 1,5 мг / кг по сравнению с 91,91 ± 1,488 в группе с ЧМТ, Среднее ± SEM, n = 6).Эти результаты показали, что витамин B12 значительно облегчил ипсилатеральный отек мозга после травмы ЧМТ.

Рис. 1. Витамин B12 сохраняет структуру тканей и защищает функциональное восстановление после ЧМТ. (A) Количественная оценка содержания воды в головном мозге в ипсилатеральной коре головного мозга через 1 день после ЧМТ. ^## P <0,01 по сравнению с фиктивной группой. ^∗ P <0,05 и ^и P <0.Значения 05 по сравнению с группами TBI представляют собой среднее значение ± SEM, n = 6. (B) Оценка теста Гарсиа через 7 дней, 14 дней после TBI. ^# P <0,05 по сравнению с фиктивной группой. ^∗ P <0,05 по сравнению с групповыми значениями TBI, представляют собой среднее значение ± SEM, n = 5. (C – D) Репрезентативные изображения H&E и окрашивания по Нисслю в коре головного мозга через 14 дней после TBI.

Восстановление двигательной функции оценивалось в течение 14 дней после травмы с использованием 21-балльной пробы Гарсиа.Как показано на Рисунке 1B, группа, подвергшаяся имитации операции, имела средний балл 21, что соответствует нормальной двигательной функции. Группа ЧМТ + витамин B12 показала лучшее функциональное восстановление через 7 дней. Кроме того, для оценки гистологической морфологии в каждой группе проводили окрашивание H&E и по Нисслю. Как показано на рисунке 1C, в группе с ЧМТ наблюдалась очевидная серьезная потеря ткани коры головного мозга по сравнению с фиктивной группой. В соответствии с оценками Гарсия, группы, получавшие витамин B12, показали меньшее повреждение тканей и апоптоз нейронов (рис. 1D), что указывает на то, что витамин B12 уменьшал повреждение тканей, защищал нейроны в коре головного мозга и улучшал патологическую морфологию области поражения после ЧМТ у мышей. .

Витамин B12, зависимый от каспазы12-зависимого апоптоза нейронов

Чтобы определить, может ли лечение витамином B12 снизить апоптоз в тканях мозга, иммунофлуоресцентное окрашивание было выполнено после ЧМТ. Как показано на фиг. 2A, лечение витамином B12, очевидно, уменьшало количество нейронов, положительных по расщепленной каспазе12, по сравнению с группой TBI. Между тем, результаты вестерн-блоттинга показали, что группы, обработанные витамином B12, показали пониженные уровни экспрессии расщепленной каспазы 12 по сравнению с их необработанными аналогами на фиг. 2B, C.Кроме того, окрашивание TUNEL проводили через 7 дней после травмы, чтобы дополнительно проверить антиапоптотический эффект витамина B12. Как показано на фигурах 2D, E, значительно увеличенное количество апоптотических клеток было обнаружено в группе TBI по сравнению с фиктивной группой. Для сравнения, лечение витамином B12 значительно изменило апоптоз, вызванный ЧМТ. Таким образом, эти результаты продемонстрировали, что витамин B ₁₂ ослабляет индуцированный TBI апоптоз нейрональных клеток.

Рисунок 2. Витамин B12 защищает нейроны от апоптоза. (A) Иммунофлуоресцентное окрашивание расщепленной каспазы-12 (зеленый) в коре головного мозга через 7 дней после травмы. Масштабная линейка = 50 мкм. (B, C) Экспрессия и количественная оценка расщепленных белков каспазы-12 в коре головного мозга через 7 дней после травмы. ^## P <0,01 по сравнению с фиктивной группой. ^∗ P <0,05 и ^и P <0,05 по сравнению с групповыми значениями TBI представляют собой среднее значение ± SEM, n = 5. (D, E) Представление и количественная оценка иммунофлуоресцентного окрашивания TUNEL (зеленый) в коре головного мозга через 7 дней после травмы.^## P <0,01 по сравнению с фиктивной группой. ^* P <0,05 и ^и P <0,05 по сравнению с значениями группы TBI, представляют собой среднее значение ± SEM, n = 5. Масштабная шкала = 100 мкм.

Витамин B12 Ингибированный сигнальный путь стресса ER

При хроническом стрессе ER ассоциированный апоптоз может вносить вклад в патофизиологические процессы, вовлеченные в ряд распространенных заболеваний, включая нейродегенеративные заболевания, диабет, атеросклероз и почечные заболевания (Tabas and Ron, 2011).Hu et al. (Wu et al., 2018) сообщили, что локализованная в ER лигаза E3 RNF183 запускает апоптоз в ответ на длительный стресс ER. Между тем, наше предыдущее исследование показало, что передача сигналов ER-стресса индуцировала апоптоз нейронов при повреждении спинного мозга (He et al., 2017). Чтобы прояснить взаимосвязь между витамином B12 и регуляцией стресса ER, мы обнаружили белки сигнального пути стресса ER и связанные с апоптозом белки с помощью вестерн-блоттинга и иммунофлуоресцентного окрашивания. Как показано на фиг. 3A – F, уровни белков, связанных со стрессом ER (GRP78, IRE1α, XBP-1 и CHOP), были значительно увеличены через 3 дня и снизились после лечения витамином B12.Между тем, иммунофлуоресцентное окрашивание показало, что количество GRP78-положительных клеток было значительно увеличено в группе TBI, а витамин B12 изменил эту тенденцию в разной степени (рис. 3B). Эти данные свидетельствуют о том, что витамин B12 снижает уровень стресса ER.

Рисунок 3. Витамин B12 снижает уровень стресса ER. (A) Репрезентативные вестерн-блоты экспрессии IRE1α, GRP78, XBP-1, Chop. (B) Иммунофлуоресцентное окрашивание GRP78 (зеленый) в коре головного мозга через 7 дней после травмы.Масштабная линейка = 100 мкм. (C – F) Количественная оценка из (A) ^## P <0,01 по сравнению с фиктивной группой. ^∗ P <0,05, ^& P <0,05 и ^&& P <0,01 по сравнению с группой TBI. ^∗ P <0,05 по сравнению с указанной группой. Значения представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего, n = 5.

Витамин B12 ингибировал повреждение микротрубочек из-за стресса ER после TBI

Многочисленные исследования показали, что витамин B12 оказывает нейропротекторное действие на ЧМТ (Sun et al., 2012; Chen et al., 2015). Мы предположили, что витамин B12 может играть нейрозащитную роль, поддерживая стабильность микротрубочек. Мы обнаружили экспрессию MAP-2 и Tau, способствующие связыванию и динамике микротрубочек аксонов, а также стабилизацию микротрубочек. Как показано на фиг. 4A – C, экспрессия MAP-2 и тау-белка снизилась после травмы, а экспрессия тау-белка была значительно выше в группе, получавшей витамин B12, по сравнению с группой TBI через 7 дней. Интересно, что только доза витамина B12 1,5 мг / кг обратила вспять потерю MAP-2.Затем мы исследовали экспрессию MAP-2 с помощью иммунофлуоресценции. Результаты показали, что MAP-2-положительные нейроны в группе TBI были значительно дезорганизованы через 7 дней после травмы. Однако группы, получавшие витамин B12, показали хорошую неврологическую морфологию, которая была подобна морфологии, наблюдаемой в фиктивной группе по сравнению с группой TBI (рис. 4D). Кроме того, этот результат был дополнительно подтвержден иммунофлуоресценцией в клетках PC12 с OGD, как показано на рисунке 4E. Белки Ace-tubulin и Tyr-tubulin были обнаружены для исследования стабильных микротрубочек и динамических микротрубочек соответственно.Результаты показали, что соотношение Ace-тубулин / Tyr-тубулин после лечения витамином B12 было увеличено по сравнению с группой лечения OGD. В совокупности витамин B12 оказывает стабилизирующее действие на микротрубочки.

Рисунок 4. Витамин B12 ингибирует повреждение микротрубочек из-за стресса ER после TBI. (A) Репрезентативные вестерн-блоты экспрессии MAP-2, Tau. (B, C) Количественное определение из (A) ^## P <0,01, ^# P <0.05 против фиктивной группы. ^∗ P <0,05, ^&& P <0,01 по сравнению с группой TBI. ^∗∗ P <0,01 по сравнению с указанной группой. Значения представляют собой среднее значение ± SEM, n = 5. (D) Репрезентативные флуоресцентные изображения, изображающие MAP-2 (зеленый) с NeuN (красный) в коре головного мозга после TBI. Масштабная шкала = 50 мкм, масштабная линейка = 10 мкм. (E) Типичные флуоресцентные изображения, изображающие Ace-тубулин (зеленый) с Tyr-тубулином (красный) в клетках PC 12.Масштабная линейка = 20 мкм. (F) Репрезентативные вестерн-блоты экспрессии IRE1α, GRP78, XBP-1, Chop, Cleaved-cas12. (G – K) Количественная оценка из (F) ^∗ P <0,05, ^∗∗ P <0,01 и ^∗∗∗ P <0,001 по сравнению с указанной группой. Значения представляют собой среднее значение ± SEM, n = 4. (L) Репрезентативные вестерн-блоты экспрессии MAP — 2, Ace-тубулина. (M, N) Количественное определение из (L) .^∗ P <0,05 по сравнению с указанной группой. Значения представляют собой среднее значение ± SEM, n = 4. (O) Типичные флуоресцентные изображения, изображающие Ace-тубулин (зеленый) с Tyr-тубулином (красный) в клетках PC 12. Масштабная линейка = 20 мкм. (П) . Репрезентативные флуоресцентные изображения, изображающие MAP-2 (зеленый) in vivo . Масштабная линейка = 50 мкм.

Затем мы исследовали взаимосвязь между защитой витамина B12 и стрессом ER с помощью 4-PBA, который является наиболее часто используемым ингибитором стресса ER.Как показано на фиг. 4F-K, уровни сигнального пути апоптоза, вызванного стрессом ER, были существенно подавлены в группе совместной обработки витамином B12 и 4-PBA по сравнению с группой витамина B12. Между тем экспрессия белков стабилизации микротрубочек (MAP-2 и Ace-tubulin) была значительно увеличена в группе совместного лечения по сравнению с группой витамина B12, что указывает на то, что опосредованная витамином B12 защита, скорее всего, была достигнута путем ингибирования стресса ER (Рисунки 4L). –N). Затем мы использовали иммунофлуоресценцию для обнаружения Ace-тубулина и Tyr-тубулина в клетках PC12 in vitro и MAP-2 in vivo .Результаты показали, что соотношение Ас-тубулин / Три-тубулин в группе витамина B12 + 4-PBA было увеличено по сравнению с группой витамина B12, что соответствовало MAP-2 у мышей (Фигуры 40, P). Взятые вместе, эти результаты предполагают, что витамин B12 способен стабилизировать микротрубочки за счет снижения уровня стресса ER.

Витамин B12 способствует регенерации миелина из-за стресса ER после TBI

Регенерация миелина является ключевым фактором восстановления сенсорных и моторных функций после травмы головного мозга (Cantuti-Castelvetri et al., 2018). Мы исследовали влияние витамина B12 на повторную миелинизацию путем окрашивания LFB. Гистопатология с окрашиванием LFB показала, что в группе TBI наблюдались поражения белого вещества в мозолистом теле по сравнению с фиктивной группой (рис. 5A). Вакуолярные изменения и потеря микротрубочек из миелиновой оболочки также наблюдались в группе ЧМТ. Обработка витамином B12 уменьшала степень разрушения миелиновой оболочки, и доза витамина B12 1,5 мг / кг показала несколько лучший эффект, чем доза 0,5 мг / кг. Затем MBP, который является составной частью миелиновой оболочки, был обнаружен с помощью вестерн-блоттинга и иммуногистохимии.Как показано на фиг. 5B – D, экспрессия белка MBP значительно снижалась после TBI, но повышалась под действием витамина B12; не было статистической значимости между двумя группами, получавшими разные концентрации витамина B12. Взятые вместе, эти результаты показали, что витамин B12 способствует регенерации миелина после ЧМТ. Затем мы исследовали, участвует ли стресс ER в защитном действии витамина B12 на ремиелинизацию. Окрашивание LFB показало, что миелиновая оболочка в мозолистом теле была прозрачной, а микротрубочки в аксонах были плотно расположены в группе витамина B12 + 4-PBA по сравнению с группой лечения витамином B12 (рис. 5E).Более того, экспрессия MBP соответствовала окрашиванию LFB. Как показано на фиг. 5F, G, экспрессия MBP была значительно увеличена в группе, получавшей совместное лечение, по сравнению с группами, получавшими витамин B12. Между тем, результаты иммуногистохимии показали, что группа витамина B12 + 4-PBA представляла более плотный и непрерывный миелин, положительный по MBP, по сравнению с группой витамина B12 (фигура 5H). Все эти результаты показали, что витамин B12 усиливал ремиелинизацию, подавляя стресс ER.

Рисунок 5. Витамин B12 защищает от повреждения миелина после ЧМТ в результате стресса ER. (A) Репрезентативные изображения белого вещества с окрашенными LFB изображениями миелиновой оболочки через 14 дней. Шкала шкалы = 1000 мкм, шкала шкалы = 250 мкм. (B, C) Экспрессия белков и данные количественной оценки MBP в каждой группе. ^## P <0,01 по сравнению с фиктивной группой, ^∗∗ P <0,01 и ^&& P <0.01 по сравнению с группой TBI. Значения представляют собой среднее значение ± SEM, n = 4. (D) Иммуно-гистохимическое окрашивание MBP в каждой группе. (E) Типичные изображения белого вещества с изображениями окрашивания LFB миелиновой оболочки через 14 дней. Шкала шкалы = 1000 мкм, шкала шкалы = 250 мкм. (F, G) Экспрессия белков и данные количественной оценки MBP в каждой группе. ^∗ P <0,05 по сравнению с указанными групповыми значениями представляют собой среднее значение ± SEM, n = 4. (H) Иммуно-гистохимическое окрашивание MBP в каждой группе.

Обсуждение

Более глубокое понимание нейрозащиты при ЧМТ помогло разработать концепцию стимулирования восстановления функции нервных клеток для потенциального улучшения функционального восстановления (Wieloch and Nikolich, 2006; Loane and Faden, 2010). В многочисленных исследованиях сообщалось, что стабилизация микротрубочек и ремиелинизация играют решающую роль в нескольких заболеваниях ЦНС (Sengottuvel and Fischer, 2011; Abu-Rub and Miller, 2018; Li et al., 2018). Существуют убедительные доказательства того, что витамин B12 способствует синтезу нейротрофических факторов, которые, в свою очередь, поддерживают рост и выживание нейритов (Okada et al., 2010). Однако до сих пор неясно, может ли витамин B12 облегчить повреждение, вызванное травмой головного мозга. Чтобы оценить эту возможность, витамин B12 вводили внутрибрюшинно сразу после ЧМТ. Результаты показали, что витамин B12 способствует восстановлению нервов после ЧМТ.

ER является основной органеллой, ответственной за сворачивание белков, биосинтез липидов и хранение Ca ²⁺ (Tsai and Weissman, 2010).Повышенный стресс ER может быть самозащитным сигнальным путем транскрипции после легкого повреждения (Xie et al., 2016). Напротив, чрезмерный стресс ER вызывает обширную гибель нейронов через активацию CHOP. CHOP находится ниже по течению от апоптоза, вызванного стрессом ER. Кальпаин, активированный в цитоплазме, расщепляет и активирует каспазу-12 в ответ на кальций, высвобождаемый ER (Hood et al., 2018; Tan et al., 2018). Было подтверждено, что стресс ER также участвует в ЧМТ (Hood et al., 2018). В настоящее время витамин B12 используется в клинике для лечения повреждений периферических нервов (Hobbenaghi et al., 2013). В этом исследовании мы обнаружили, что стресс ER участвовал в процессе лечения ЧМТ витамином B12 (рис. 3). Как показано на рисунке 3A, IRE1α, GRP78, XBP-1 и CHOP значительно увеличились после травмы ЧМТ и полностью прекратились после 3-дневного лечения витамином B12. Между тем, витамин B12 смягчал апоптоз, вызванный стрессом ER. В совокупности стресс ER играет важную роль в индукции апоптоза нейронов после TBI, а витамин B12 ингибирует гибель нейронов путем подавления стресса ER.

В растущем числе исследований сообщается, что стабилизация микротрубочек может играть ключевую роль в регенерации аксонов при некоторых заболеваниях ЦНС (O’Donovan, 2016; Abu-Rub and Miller, 2018; Chuckowree et al., 2018). В поврежденном мозге микротрубочки уязвимы для рассогласования и растворения в нейронах. Микротрубочки также участвуют в вызванных травмой глиальных ответах и адаптивной нейропластичности после травмы (Chuckowree et al., 2018). Белок тау участвует в регуляции сборки и разборки аксональных микротрубочек.Сообщалось, что уровни фосфотау в плазме и соотношение фосфотау / общий тау во время острой фазы и хронической ЧМТ превосходили уровни общего / тау-белка в качестве отличительных показателей тяжести и статуса пациентов с нейротравмой из здоровой контрольной группы (Rubenstein et al. ., 2017). Это исследование также продемонстрировало, что витамин B12 может поддерживать стабильность микротрубочек после ЧМТ. Как показано на Фигуре 4, витамин B12 оказывает стабилизирующее действие на микротрубочки in vitro и in vivo .Между тем, высокая доза (1,5 мг / кг) лечения витамином B12 показала лучшую эффективность, чем доза 0,5 мг / кг у мышей с ЧМТ. Кроме того, комбинированная терапия с ингибитором стресса ER 4-PBA частично усиливала нейрозащитный эффект витамина B12. Однако вопрос о том, ингибирует ли витамин B12 напрямую сигнальный путь стресса ER, требует дальнейшего изучения.

Коллапс конуса роста, вызванный повреждением ЦНС, и ретракция аксонального цитоскелета тесно связаны с молекулами, ингибирующими рост, связанными с миелином (Stassart et al., 2018). Миелинизирующие клетки, окружающие аксоны, не только ускоряют распространение электрических импульсов, но также обеспечивают метаболическую поддержку аксонов и уточняют нервные цепи (Figlia et al., 2017). Миелин играет важную роль в прогрессировании патологии белого вещества после ЧМТ и в потенциале пластичности и последующего выздоровления (Armstrong et al., 2016). Кроме того, миелин является активной формой витамина B12, а MeCbl играет важную роль в синтезе и поддержании миелина (Gröber et al., 2013). Витамин B12 ускоряет дифференцировку шванновских клеток, подавляя активность Erk1 / 2 (Nishimoto et al., 2015). Кроме того, сообщалось, что витамин B12 способствует ремиелинизации у крыс с очаговой демиелинизацией (Nishimoto et al., 2015). Таким образом, мы оценили влияние витамина B12 на ремиелинизацию после ЧМТ. Эти данные свидетельствуют о том, что витамин B12 увеличивает уровень MBP, который играет жизненно важную роль в процессе миелинизации и соответствующем формировании толщины и компактности миелина.Между тем, окрашивание LFB показало, что витамин B12 восстанавливает миелин за счет уменьшения вакуолярных изменений в миелиновой оболочке после TBI. Мы также использовали ингибитор стресса ER 4-PBA для оценки роли стресса ER в ремиелинизации. Результаты показали, что стресс ER участвовал в лечении повреждения миелина, вызванного TBI, витамином B12. Таким образом, мы можем сделать вывод, что витамин B12 увеличивает выживаемость нервных клеток у мышей с ЧМТ, подавляя стресс ER. В нашем дальнейшем исследовании мы изучим влияние витамина B12 на глиальные клетки и взаимосвязь между мембранно-ассоциированными белками и сигналами аутофагии, в конечном итоге достигнув цели более глубокого понимания механизма лечения витамином B12 при ЧМТ.

Заявление об этике

Уход и использование всех животных были одобрены этическим комитетом Медицинского университета Вэньчжоу и соответствовали руководящим принципам, установленным Китайскими национальными институтами здравоохранения.

Авторские взносы

AH и DC разработали и разработали эксперименты. FW, KX, LL, MZ и CT провели эксперименты, проанализировали данные и написали или исправили рукопись. KZ, LX, HT, YH и YX оказывали помощь в проведении экспериментов. HZ отвечал за дополнение эксперимента и модификацию рукописи.Все вышеперечисленные авторы обсудили результаты и одобрили отправку рукописи.

Финансирование

Эта работа была поддержана исследовательскими грантами Национального фонда естественных наук Китая (81802251, 80217111) и Китайского провинциального фонда естественных наук провинции Чжэцзян в рамках грантов №№. LQ18h250003 и LY19h250001.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Список литературы

Абу-Руб, М., и Миллер, Р. (2018). Новые клеточные и молекулярные стратегии усиления ремиелинизации центральной нервной системы (ЦНС). Brain Sci. 8: 111. DOI: 10.3390 / brainsci8060111